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化学发光免疫分析仪原理简介
发布日期:2023/6/24 10:22:12

概念:化学发光标记免疫分析,别称:化学发光免疫分析(CLIA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析仪器。

化学发光免疫分析仪包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。

原理:利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。

化学发光免疫分析仪器中核心探测器件为光电倍增管(PMT),由单光子检测并传输至放大器,并加高压电流放大,放大器将模拟电流转化为数字电流,数字电流将发光信号由R232数据线传输给电脑并加以计算,得出临床结果。

化学发光标记免疫分析法

化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CLIA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridinium ester (AE) ,是有效的发光标记物 , 其通过起动发光试剂作用而发光, 强烈的直接发光在一秒钟内完成,为快速的闪烁发光。吖啶酯作为标记物用于免疫分析, 其化学反应简单、快速、无须催化剂; 检测小分子抗原采用竞争法 ,大分子抗原则采用夹心法 , 非特异性结合少, 本底低; 与大分子的结合不会减小所产生的光量, 从而增加灵敏度。

发光酶免疫分析法

从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析( chemi luminescent enzyme immuno assay, CLEIA ) , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反应,免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶(ALP) ,它们有各自的发光底物。

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